雙抗混合液（100X）用于預(yù)防細(xì)胞培養(yǎng)的細(xì)菌污染，特別是革蘭氏陽(yáng)性和陰性細(xì)菌的污染。產(chǎn)品經(jīng)過(guò)濾除菌處理，可以直接添加到細(xì)胞培養(yǎng)液內(nèi)。青霉的含量為10kU/ml，含量為10mg/ml.在細(xì)胞培養(yǎng)液中推薦的青霉的工作濃度為100U/ml，鏈霉的工作濃度為0.1mg/ml。即按照100倍稀釋使用即可。
核心操作要點(diǎn)如下：
一、配制與保存
工作濃度：按1:100比例稀釋?zhuān)ㄈ?ml雙抗母液+495ml培養(yǎng)基），終濃度青霉素100U/ml、鏈霉素0.1mg/ml。
保存條件：母液需-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融（≤3次）；工作液需2周內(nèi)用完。
二、使用流程
實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：徹底清除舊培養(yǎng)基，PBS潤(rùn)洗后加入預(yù)溫的雙抗培養(yǎng)基。
無(wú)菌操作：在超凈臺(tái)內(nèi)完成，使用無(wú)菌移液器具，開(kāi)蓋后優(yōu)先分裝母液。
解凍與溶解：母液需2-8℃緩慢解凍，若出現(xiàn)結(jié)晶可37℃溫育20-30分鐘或輕輕搖勻，禁止劇烈震蕩。
注意事項(xiàng)：
避免污染：操作全程需無(wú)菌，母液分裝后使用，減少污染風(fēng)險(xiǎn)。
濃度控制：過(guò)高濃度易致細(xì)胞毒性，需嚴(yán)格按比例稀釋。
特殊場(chǎng)景：
難抑菌污染：改用含慶大霉素或兩性霉素B的三抗溶液。
無(wú)血清培養(yǎng)：選擇無(wú)動(dòng)物源成分的合成抑菌劑。
流式細(xì)胞術(shù)干擾：選用無(wú)酚紅配方的雙抗溶液。
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